作者CD133 (迷思)
看板Biotech
标题Re: [方法] Heat-induced epitope retrieval
时间Tue Dec 11 09:08:48 2012
提供个人使用的方法作为参考:
加热方式主要有两种
1. 微波,最强火力,10-20分钟
2. autoclave,一般灭菌条件,10-20分钟
不过也看过有人用hotplate,直接把烧杯的水煮滚,再隔水加热,10-20分钟
buffer有三种
1.Tris-EDTA (pH 9.0)
Tris 10 mM
EDTA 1 mM
可配10X stock solution备用
这个buffer可以让染色比较深,但是同样会得到比较脏的background
2.sodium citrate (pH 6.0)
sodium citrate 10 mM
3.citric acid buffer (pH 6.0)
citric acid 10 mM
无论用哪一种buffer,都可以考虑在里面加 0.05% Tween-20
记住,正确的pH值非常重要。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.72
1F:→ lupeashn:推!正确的PH值..pH9 容易掉片 请小心配制 12/11 21:09
2F:推 McCabe:谢谢你的分享! 12/11 21:29