作者wang7514 (scientific dream)
看板Biotech
标题Re: [求救] 为何细胞要先 pretreat 药剂, 然後再刺激
时间Fri Nov 30 15:44:46 2012
※ 引述《konnankonnan (天使海豚)》之铭言:
: 想请问一下..
: 之前看到一些文章, 会将 inhibitor 与癌细胞 (A549) 先进行培养 30 分钟
: 然後再用刺激剂 (例如: PMA)诱导某个蛋白质表现 (caspase 或 COX-2),
: 之後会利用 Western blotting 或其它方法分析 caspase 或 COX-2 的表现
: 我想请问的是...
: (1)将 inhibitor 与细胞先进行培养的目的为何 ?
文章内应该会说明是何种inhibitor,可能是防止某条传递路径活化
或是避免某种已知的caspase or COX-2调控蛋白活化,以排除作者实验结果上的其他可能
: (2)为何时间是 30 分钟, 而不是其它时间, 例如 12 小时 ?
处理时间应该是要看inhibitor的效果,端看作者所抓的条件
: (3)加入刺激剂之前, 细胞要先 wash 吗 ?
这部份应该可以看文章里的materials & methods....
: (4)如果是悬浮型细胞, 像是: Jurkat cell, 要如何处理 ?
如果你是指wash的部份,一般可以先离心再将培养液吸掉,
再重新加入还有药剂的培养液继续培养
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◆ From: 163.25.89.48
1F:推 ZnU:王博士好~ 12/05 01:02