作者applephant (MOGU)
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标题Re: [求救] 真菌子实体DNA萃取
时间Thu Nov 15 17:05:09 2012
※ 引述《stormcorn (0是)》之铭言:
: ※ 引述《YuDavid (讨厌失眠)》之铭言:
: : 大家好
: : 一些算是技术上面的问题想请教大家
: : 是关於DNA extraction的
: : 之前我抽取的样本大多是动物或细菌
: : 最近学姊突然搞到牛樟芝子实体说要做一点实验
: : 可是我没有抽过真菌 查了一些资料 好像说子实体很难抽
: : 主要是最一开始的细胞破碎/裂解的部份有点困难
: : 不知版上是否有在做真菌的先进可以传授点经验
: : 而且我没有查到for yeast dna extraction的kit
: : 还是说我们之後是直接跑pcr
: : 有什麽物理方法或类似煮沸法
: : 然後直接拿去pp看
: : 类似细菌的菌液pcr
: : 不知道真菌这样行得通吗@@
: : 不晓得能否给我一些建议呢 谢谢各位!
: 1.冷冻乾燥你的真菌样本
: 2.液态氮研磨你的冻乾真菌样本
: 3.粉末状态下, 秤取你要的克数, 其余用样本瓶低温保存
: 4.加入DNA LYSIS BUFFER (破植物的也可以 主要是细胞壁)65度煮过的方法最好
: 5.接下来就一般的DNA萃取法
: 参考来源:主修真菌的自己
我之前是做类似牛樟芝的硬菇类
我的作法是先从子实体切下活性较高的部份 通常是最外缘 颜色较浅处
需剪开取内部组织否则表面很多杂质 切越细越好
取约1.5tube一半的量後把tube直接丢到装液态氮的桶子里脆化
然後火速利用高速震荡细胞破碎仪震成粉末状
接着照一般的DNA抽取kit做就可了
ps若没有破碎机可以像楼上那样倒液态氮下去磨 小心很会喷就是了
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