作者aggaci (可找我下棋..)
看板Biotech
标题Re: [求救] Rat cortical neuron 培养
时间Thu Nov 15 15:03:34 2012
※ 引述《kattyhouse (kat)》之铭言：
: 因为实验室刚开始做cortical neuron的primary culture...
: 所以想跟版上前辈们请教
: 是取出生24hr内SD Rat 的cortex 使成为 single cell
: 再利用DMEM/F12+10% FBS 培养24hr後
: 才换成DMEM/F12+B27+Ara-C (10uM)
: 并且会另外添加钾离子(K+)使Medium中的钾是20-30mM
: culture在PDL(poly-D-lysine) coating 的coverslip上 (cell density是2X10^5)
: 但是细胞会在1周内死亡
: (4-5天会有morphology的change会有细胞空洞并且有凋亡的现象)
: 但一般都可以培养2week以上...
: 请问有前辈知道是哪里有做错的地方吗??
: 谢谢
primary neuron请取怀孕16-18天的胎鼠
纯度高又好养!
medium用neurobasal+B27
--
单身不代表寂寞，寂寞是走在一个不爱你的人身边的时候。
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.72
1F：推 kattyhouse:不过因为成本考量及我同学他不敢(想)剖腹所以就没有办 11/15 21:23
2F：→ kattyhouse:法用你的方法做耶~不过我不清楚16-18天跟出生後的老鼠 11/15 21:24
3F：→ kattyhouse:有很大的差别吗? 谢谢你喔~ 但neurobasal是liquid的培 11/15 21:25
4F：→ kattyhouse:养液~想请问您有买过powder的吗? 谢谢~ 11/15 21:26
5F：推 jasonstudio:我们实验室也有做耶 也是用胎鼠哦 11/16 00:54
6F：→ jasonstudio:不过我记得弄成SINGLE CELL的过程蛮重要的 11/16 00:55
7F：→ jasonstudio:另外neurobasal + b27无误~ 11/16 00:57
8F：→ aggaci:P1或p2的neuron culture大部份都是astrocyte 11/16 12:16
9F：→ aggaci:E16-E18的neuron80%以上是neuron 11/16 12:16
10F：推 kattyhouse:所以是直接打成single cell就直接种在neurobasal+B27中 11/16 16:36
11F：→ kattyhouse:也不用加ara-C或其他的东西之类的吗? 11/16 16:37
12F：→ kattyhouse:还是仍然要在含有FBS的贴24hr後才换成neurobasal+B27 11/16 16:38