作者kattyhouse (kat)
看板Biotech
标题[求救] Rat cortical neuron 培养
时间Thu Nov 15 14:47:13 2012
因为实验室刚开始做cortical neuron的primary culture...
所以想跟版上前辈们请教
是取出生24hr内SD Rat 的cortex 使成为 single cell
再利用DMEM/F12+10% FBS 培养24hr後
才换成DMEM/F12+B27+Ara-C (10uM)
并且会另外添加钾离子(K+)使Medium中的钾是20-30mM
culture在PDL(poly-D-lysine) coating 的coverslip上 (cell density是2X10^5)
但是细胞会在1周内死亡
(4-5天会有morphology的change会有细胞空洞并且有凋亡的现象)
但一般都可以培养2week以上...
请问有前辈知道是哪里有做错的地方吗??
谢谢
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