作者sjacky (陈小文)
看板Biotech
标题[求救] 请教PCR product电泳遇到smear该如何解决
时间Tue Nov 13 21:00:46 2012
各位先进 大家好
最近在PCR上遇到瓶颈，实在无法解决，所以上来请教各位
如图一
http://0rz.tw/dblVc
10(A primer) 11(B primer) 12(C primer)的部分先前所作之PCR product当作
positive control
Reagent、ddH2O、Primer(5’- lable DIG)、Buffer均已换新
图二
http://0rz.tw/NCaHd
8(A) 9(B) 10(C)的部分为新做的positive control，在10的部分出现了smear，
而5(A) 6(B) 7(C)的部分为NTC，5(A) 7(C)的部分很正常，而6(B)的部分也出现
了smear，不管是有没有加Sample或是H2O，只要有B这组primer就会出现smear。
请问这个情形下，大家为什麽会出现这样况状？
Primer为刚新订回来的
万分感谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.38.226.41
1F：推 aggaci:smear=>降低镁离子浓度 11/13 23:59
2F：→ meder:没加sample也会有smear? 11/14 19:52
3F：→ sjacky:是的！primer错配？ 11/17 09:43
4F：推 chuenwon:anneling温度调高 ?? 11/17 17:58