作者nhxcyge (人生就像个不可逆反应)
看板Biotech
标题[求救] co-transfection
时间Wed Oct 31 21:11:18 2012
请问有做过co-transfection的各位，
近期我使用MCF7作transfection，发现只有其一会transfect成功，
亦即plasmid A和plasmid B中，我用western确认，只认到plasmid A
作出来的protein，却没有plasmid B。
这二个plasmid的vector是相同的(pcDNA3.1)，protein大小差30 kDa左右。
目前有二个想法：
1、先transfect其中一个plasmid，过一段时间後(~8 hr)换medium，再transfect
另一个plasmid，再等48 hr。
2、作不同ratio的搭配，原本A:B=1:1，改成1:2, 1:3的组合，抓condition。
或是各位有什麽可能的解决方案呢？？谢谢！
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◆ From: 140.114.237.129
1F：推 williamyang:把其中ㄧ个的backbone换别的呢? 10/31 22:04
2F：推 joseph103331:各自transfect会成功吗? 11/01 00:24
3F：→ nhxcyge:我有单独transfect plasmid B，可以成功。 11/01 08:39
4F：推 tsubasawolfy:换backbone吧 11/01 10:27
5F：→ heavenfree:有考虑过用bicistronic vector吗? 11/04 22:01
6F：→ nhxcyge:我现在先试我的二个方案，再不行再试各位的建议T^T 11/04 23:03