作者mongi (大体老屍)
看板Biotech
标题[求救] RNA gel 有问题
时间Mon Oct 22 23:59:47 2012
各位晚安 小弟新手今天第一次抽RNA
抽的是cell monolayer 完全遵照protocol做
经过数次离心要去测浓度
值437ng/ul A260/280=2.03 A260/230=2.03(好像不能高於2?)
为了知道自己抽的RNA是否够纯我去跑gel 50V 30cc 1.5%
照下来发现 18S很清楚 但28S没看见
想请问大家这样状况的原因是什麽
我的想法会不会是sample污染 或是有抽到DNA
2. 做agrose胶时 染剂本来加2-3ul 结果我加了20ul (整个很黄)
有影响跑胶吗 我照下来似乎没什麽差别 (我们不用Etbr)
3. 照下来感觉杂点有点多 不知道是溶不完全还是胶台没擦乾净
恳请大家帮忙了 也祝各位实验操作顺利
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◆ From: 140.116.133.119
※ 编辑: mongi 来自: 140.116.133.119 (10/23 00:01)
1F：推 aceliang:内染？我怎麽记得dye都是跟denatured sample放一起？ 10/23 00:34
2F：→ nike77114:应该是安全染剂 10/23 01:44
3F：→ nike77114:如果是gDNA污染会出现在最上方 10/23 01:44
4F：→ nike77114:你marker情形如何? 10/23 01:45
5F：→ Ice9:你是说4.5kb的位置上完全没有讯号？ 安全染剂也只是相对安全 10/23 10:37
6F：→ huuban:是不是RNA降解了？你们有跑marker吗？marker正常吗？ 10/23 12:09
7F：→ mongi: 实验室没有rna marker,所以直接load sample 10/23 12:14
8F：→ Ice9:就算没有RNA marker，用 DNA marker 也是能稍微定位...... 10/24 12:19
9F：→ huuban:再抽一次吧，说不定样本早就挂了 10/24 14:29
10F：推 arsene1989:你电泳跑多久? 10/25 14:44