作者Rodolfo2010 (雷米亚兹)
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标题Re: [求救] Sorbitol的功能?
时间Fri Oct 12 21:22:45 2012
※ 引述《kobeiloveyou (我超强暴)》之铭言：
: 大家好
: 在抽酵母菌DNA时
: 有的方法会在破菌的buffer加入sorbitol
: 想请问加sorbitol的功能是?
: 是维持渗透压吗? 但抽DNA都要破菌了 还维持渗透压做什麽
: 希望有人可以帮我解答 谢谢!!
加sorbitol就是要维持渗透压
你这方法应该是要配合Zymolase先分解细胞壁
等细胞壁被分解後 离心沉淀原生质
去上清後 再利用含detergent的buffer将细胞打破
如此可以取得量多质优的genomic DNA
所以在分解细胞壁那步骤时 buffer中要含有高浓度的sorbitol (1 M)
这样细胞膜才不会先涨破
希望有回答你的疑问
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◆ From: 118.171.120.108
1F：推 kobeiloveyou:谢谢!!那细胞膜再破细胞壁那步骤先涨破 DNA会怎样吗? 10/12 21:36
2F：推 kobeiloveyou:之後不是也要破膜,分解细胞壁时也能破膜不是比较好 10/12 21:43
3F：→ Rodolfo2010:Lysis buffer通常体积比较大,如果直接让DNA跑出来, 10/12 21:43
4F：→ Rodolfo2010:那DNA浓度不就变稀了? 10/12 21:45
5F：→ Rodolfo2010:更何况Lysis buffer的环境不适合溶DNA 10/12 21:46
6F：推 kobeiloveyou:了解了谢谢! 10/12 21:52
7F：推 TW185930:推 10/14 13:10