作者Shinn826 (始终都是独自一人)
看板Biotech
标题[求救] SDS-PAGE分离tissue lysate
时间Wed Sep 19 13:30:32 2012
我的实验步骤大略是
先将组织用lysis buffer萃取tissue的蛋白质
lysate先用50kDa的centrifugation脱盐兼分离，再用30kDa的再次分离。
因为我的目标物在MALDI-TOF中，其碎片讯号为10.9kDa，此讯号出现在30~50kDa的lysate
里。
想请问有办法利用SDS-PAGE分离出这范围的protein吗?
我该选用几%的separarte gel?
在发问之前我有试跑过几片，实验室学长是说marker等产data再加，所以我是跑一些
standard、30~50kDa、大於50kDa。其中30~50kDa和大於50kDa有重叠的band，会有可能
是分子量太接近导致跑不开吗?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.123.62
1F：推 joseph103331:看marker分离的程度不是比较准吗? 就连standard一起 09/19 13:45
2F：→ joseph103331:试阿 作一系列的PAGE图以後实验室就都可以参考了吧 09/19 13:46
3F：→ joseph103331:不然每次都还要try 省个marker的小钱没多大意思orz 09/19 13:46
我的实验室内有的marker，外盒和说明书都被已经离开的学长丢了，根本无从得知。
要新添购marker可能还要好一阵子Orz
※ 编辑: Shinn826 来自: 140.128.123.62 (09/19 14:54)
4F：推 alaric:marker说明书, 去原厂网页找PDF档或说明网页. 09/20 00:32