作者tabo1989 (向日葵大灿笑)
看板Biotech
标题[方法] ligation
时间Sun Sep 2 23:11:03 2012
请问做ligation时一直挑到空的vector要怎麽调整condition? 我的条件是（1）vector+insert=100 ng(2)(vector/mw):(insert/mw)=1:3,1:5,1:7我都试过了
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◆ From: 49.215.249.144
1F：→ soom:加做alkaline phosphatase (CIP) 可能有帮助 09/02 23:15
2F：→ RickyKckao:可以试试ligation的时候加polyethylene glycol (PEG) 09/02 23:48
3F：→ jihyang:我用 alkaline phosphatase 做出来的clone都怪怪的说... 09/03 09:16
4F：→ jihyang:vector+insert =1:3 (total 200ng)4度C ligation O/N 试试 09/03 09:17
5F：→ jihyang:可能就最後挑多一点吧.. 之前经验 一次挑了25个 一次7个就 09/03 09:17
6F：→ jihyang:有了... 颇运气的 ~ 可以找新手 会有新手运XD 09/03 09:18
7F：→ tabo1989:我有加CIP,但看起来都不work. 09/03 10:36
8F：→ tabo1989:都放室温下，overweekend 09/03 10:36
9F：→ tabo1989:哈哈哈！挑好久（（泪... 09/03 10:39
10F：→ spirithorse:ligate过周末的话还是放4度比较好,有跑胶确定vector 09/03 16:40
11F：→ spirithorse:有没有切乾净吗? plate上的colony是否爆炸多(plasmid) 09/03 16:41