作者starjim (Jim)
看板Biotech
标题[求救] RNA转RT时忘记加RT enzyme
时间Sat Aug 4 19:51:49 2012
利用的是fermentas的kit
RNA要转cDNA时加了dNTP、oligo dT、5Xreaction Buffer
但这次我忘记加了RT enzyme就直接跑了
等跑完RT後 跑PCR发现都没有band 回想起来才发现忘记加RT enzyme
RT的作用时间是42度C 60分钟，70度C 5分钟
我想请问的是可以把之前跑出来的RT product加入enzymeme後再跑一次吗
因为我的RNA不太够再跑一次RT...
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◆ From: 111.250.35.198
1F：推 Realthugz:...RNA还活着吗 08/04 22:28
2F：→ RickyKckao:应该degrade完了吧... 08/04 22:32
3F：→ Ianthegood:不加白不加 sample比enzyme还值钱阿(误) 08/05 02:29
4F：推 huuban:重抽RNA 08/05 22:06
5F：推 llod:所以RNA剩多少?你把体积放大再试ㄧ次reaction,不过我猜RNA 08/06 10:37
6F：→ llod:已经死光了 08/06 10:37
7F：→ blence:除非你正常RT完20ul体积全部都拿去跑PCR,不然剩下的RNA怎麽 08/06 12:44
8F：→ blence:会不够？可以看一下RT kit提到的RNA最低用量,应该够用才对 08/06 12:45
9F：推 joseph103331:至少....有个negative control.... 08/06 16:04
10F：推 icome:品质已经不好了 重做吧 免得後续浪费更多时间 08/06 22:39
11F：推 nike77114:重作。不要浪费时间 08/07 00:07