作者likemsn (是喜欢msn不是喜欢男生)
看板Biotech
标题[闲聊] 有关PCR的taq enzyme
时间Fri Jul 6 17:21:49 2012
小弟算是作PCR实验的新手
作实验作了一段时间後
发现作PCR的 taq enzyme是一个很奇妙的东西
我们家作实验时会把PCR buffer，dNTP mix，primer和taq先加在一起
之後在"放在冰上"操作
可是据小弟了解，taq不是一种很稳定的东西嘛?
它连九十几度高温都可以忍受
那为啥不能在室温下操作?
而且保存时都要放在-20度
这个问题我想了很久，不晓得有没有高手可以帮我解答
感谢~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.160
1F：推 huuban:室温操作可以啊，只是因为是酵素，当然要保护它罗 07/06 18:07
2F：→ huuban:基本上Taq运送的时候是室温在运送的.. 07/06 18:07
3F：→ forWinds:恩 以前常听老师说Taq太少的话PCR後期死光就没了 07/06 18:19
4F：→ ashiniii:能忍受高温不等於稳定 07/06 18:27
5F：推 qiet:能忍受不代表Taq在那个温度很开心很稳定 还是会坏的 07/06 19:39
6F：→ qiet:而且一管taq可能会用很多次 所以才要放在冰上 07/06 19:39
7F：推 batatas:90多度可以忍受 可是还是有其寿命 所以你看一般taq都会说 07/06 20:57
8F：→ batatas:45cycle後或72度长时间後 其活性就衰减 07/06 20:59
9F：推 jabari: Taq: 啊啊啊~~ 要坏掉了~~ 07/06 23:15
10F：推 Realthugz:我有听说你这样搞会有non-specific binding 07/06 23:31
11F：→ WinnieDad:其中一个重要的原因是低温下可避免不想要的反应发生，譬 07/09 07:51
12F：→ WinnieDad:如楼上提及的non-specific binding。 07/09 07:52
13F：→ likemsn:感谢各楼层大大精辟的解析~我再消化一下~^^ 07/09 17:05
14F：推 icome:没错 放冰上是避免非专一性反应 有hotstart可以放室温 07/10 08:35