作者c1314205 ()
看板Biotech
标题[求救] western blot band 反白
时间Fri Jul 6 15:29:29 2012
想请问一个问题，压caspase-3，proform的有压出来(黑band)，
但是actived caspase-3 的band是白色的，
正负片没有调，
压caspase-9(黑band)，没有这问题，
substrate的反应时间也很少，说是过量反应的话，也很奇怪！
想知道是哪里出错了!
麻烦各位了！感激不尽!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 120.101.28.119
1F：推 Realthugz:谁告诉你说短时间不会爆炸的... 07/06 23:33
2F：推 owl628:蛋白量很多的话短时间还是会过量反应阿 07/07 00:58
3F：推 joseph103331:加太多 不到一秒就爆了 07/07 21:07
4F：推 sancra:我碰过很多ab是ECL一加下去，就亮了，肉眼可见 07/08 01:05
5F：推 aeeaee1128:一抗浓度再降低,有回收使用的话再加buffer稀释吧~ 07/08 01:24
6F：推 knell:同意爆炸+1~ 07/09 11:04
7F：推 umijuki:我是生技公司的厂商，band会反白大多会是跟你的ECL反应太 07/10 20:08
8F：→ umijuki:快速，讯号一下冲上去你的蛋白就烧掉了，一秒也会爆哦~ 07/10 20:09
9F：→ c1314205:爆的话也很奇怪，因为是切出来的，如果会爆，那PROFORM的 07/10 21:41
10F：→ c1314205:也会爆了，因为量比较多。目前是将1抗稀释2000倍， 07/10 21:43
11F：→ c1314205:proform的背景不在那麽深，可是cleaved 却没压出来。 07/10 21:46
12F：推 icome:substract快速被消耗导致没讯号 07/12 12:40
13F：→ Anvec:pro- 跟 actived form 是同一支抗体吗 如果是不同支抗体 07/14 19:11
14F：→ Anvec:可能要调整一下抗体的 titer 如果是同支 通常 act-form 量少 07/14 19:11
15F：→ Anvec:比较难压出来 有图可以给大家看会比较清楚是压没有还是反白 07/14 19:12
16F：推 silentence:白是反白还是空的? 如果是空就是active form不多 07/14 21:02
17F：推 silentence:反而是要压久点 07/14 21:05
19F：→ c1314205:19&set=a.265618446885587.60812.100003123028856&type=3 07/25 14:34
20F：→ c1314205:&theater 很抱歉，因为不知如何缩网址，抗体是一样的! 07/25 14:35