作者erse (礼拜天的下午)
看板Biotech
标题[求救] EMSA
时间Tue Jun 26 14:47:45 2012
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
各位版友大家好~
最近在做EMSA相关的实验
发现一个问题 我纯化的蛋白若加入越多
band 就会 shift的越高 请问该怎麽调整呢? 我的probe长度 200bp
用的是6% native gel
想法: 1. multiple binding sites?
2. oligomerization?
3. probe太长? 改小一点?
4. poly dIdC 多加一些?
先谢谢大家了!!!^^ 只差这个问题 老板就可以接受我的实验了><
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.55.233
1F：→ milkpa:问题在於你想看什麽，蛋白越加shift越高表示 a)有多个蛋白 06/26 15:38
2F：→ milkpa:结合序列，b)有non-specific binding，有不同解决方式 06/26 15:39
3F：→ erse:请教一下 若是nonspecific binding要如何解决呢? 谢谢^^ 06/26 21:08
4F：推 olpo:EMSA只是很粗略的实验 大概看两者有无interaction 06/27 10:37
5F：→ olpo:要如何区分专一或非专一是看不出来的 06/27 10:37