作者a74651 (欧欧欧)
看板Biotech
标题[求救] T7 RNA Polymerase纯化
时间Thu Jun 21 21:27:54 2012
最近在clone T7 RNA polymerase,目前是先将此基因接在pUC系统的载体上,
之後是预计转型到DH5alpha中表现。那我之後改怎麽纯化呢?
还是有其他神人们也纯化过此酵素,用的是其他方法?
可不可以告诉我一下大略的方法呢?
原本是将它接在pET20b上之後要转型到BL21(DE3),因为它有His taq之後较好纯化
但是碍於BL21(DE3)上本身已有T7 RNA polymerase怕会影响到,所以没有继续做下去,
不知道这方法可不可行...
请各位有纯化过此酵素的大大们帮帮我吧!!!!
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