作者higaaoi ()
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标题[求救] FPLC的吸光值
时间Tue Jun 19 22:15:28 2012
事前将海底生物中的蛋白质取出
先用FPLC做分离
有试过一些注射量，不会严重改变图形的前提下
注射比较高的蛋白进去
後来老板竟然说为什麽OD280 nm怎麽高到2200 mAU 左右
合理的范围最高在1700 mAU左右才是，最理想是1500 mAU
然後说要稀释重跑一张图比较好
他又没有要定量，而且各Fraction也不纯也谈不上定量
再说每种蛋白定量的线性范围可以一视同仁吗
他是用分光光度计的标准看待FPLC经由column後测量UV的值......
不知道大家看法如何
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 111.240.95.211
1F：→ trumpet:过column後测UV280nm，和分光光度计标准你觉得有何不同?? 06/19 23:09
好像没不同，原理是一样，但两者的数值是否因不同机型，不知道是否能转换
是对老板坚持数值不可以高於他讲的，感到有点疑惑
分光光度计是知道1.5-2.0 AU算是定量用的最高值了，
接LC的UV detector也是吗？
※ 编辑: higaaoi 来自: 111.240.95.211 (06/19 23:44)
2F：推 olpo:数值过高或过低会降低侦测的准确性 但是其实不会差很多 06/20 01:50
3F：→ olpo:从以前看过的书来讲 理想值附近的准确率是99.9% 06/20 01:52
4F：→ olpo:超过理想值好几倍准确率只剩99.5% 06/20 01:53
5F：→ olpo:以这些蛋白质实验来讲 其实差没多少 所以不用担心老师讲的 06/20 01:54
6F：推 sandcu:感觉没差耶@@ 06/20 19:57