作者gqqueen ()
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标题[求救] 细胞药物处理後，在soft agar assay探讨
时间Mon Jun 18 03:30:00 2012
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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想请问大家一个实验结果的讨论，
我想探讨手中的药物是否影响癌细胞transformation activity，
於是将细胞药物处理(IC50浓度)三小时候後洗掉，
然後重新种在soft agar中去观察细胞生长状况，
结果的确是药物处理过後的几乎不长，而对照组则继续生长，
本来很高兴我的药物的确影响了他的transformation activity，
但後来有个老师问了一个问题，
你怎麽确定细胞经过药物处理後，
在soft agar assay不长，不是因为细胞死掉或是生长速度变慢，
而是影响到transfomation activity?
这个问题让我想了很久，还是没有答案。
目前我有观察药物处理後三小时，
细胞型态没有改变，
拿去看cell cycle细胞多半聚集在S phase 和G2/M，没看到任何细胞死亡的迹象
另外我同样的处理也做了clonengenic assay
观察到细胞的确会因为药物处理时间长短而影响到他的细胞群落数目
但我还是无法利用我手边的资料来回答药物是否影响会transfomation activity?
想请问有做药物开发的前辈
是否有类似经验可以建议呢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 122.117.13.40
1F：推 genep:做个proliferation assay? 06/18 04:16
2F：→ gqqueen:同样药物处理时间三小时，连续测过0,24,48三天，有的细胞 06/18 11:34
3F：→ gqqueen:在48小时看到有显着差异，有的则没有，但在24小时则皆无 06/18 11:35
4F：→ gqqueen:显着差异 06/18 11:35
5F：→ blence:你药物处理後在soft agar放多久看colony，clonogenic跟FACS 06/18 12:55
6F：→ blence:也要等一段相同或可比较的时间,才能归纳观察三个实验的结果 06/18 12:58
7F：→ gqqueen:soft agar 大概是一个月才观察的到 clonengenic 约2~3礼拜 06/19 09:21
8F：→ gqqueen:flow最常只有48小时而已 06/19 09:22