※ 引述《kakaman (日子过的真快阿)》之铭言： : 发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出 : 以方便板友帮您追踪问题 : ----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章---- : 想请问一下 : 冷冻切片大家都切多厚 : 最近老板要求我切30um...因为这样可以看到更多的神经细胞与fiber : 我有做profusion,然後浸泡在PFA中overnight : 接着用30%蔗糖(in PBS)脱水,接着以乾冰做包埋 : 隔天便进行切片, : 切10~15um还ok,再切厚一点组织就裂的很严重 : 难道要将温度再调高几度切吗?还是有其他方法小撇步可以切到30um? : 可以请有经验的前辈给我一点意见吗? : 谢谢大家~~ 一般冷冻切片都是切20um以内 个人经验，太厚的话，除了你说得容易破损，後续染色也很容易掉片。 你要切厚，扫confocal的话，其实很多人是用vibrotome，震荡切片 (机器也相对便宜，大概25万) 大概可以切50um~200um 扫神经组织，z-stack 叠起来会很漂亮。 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.235.72