作者mini37 (将将)
看板Biotech
标题[求救] 蛋白质诱导
时间Thu May 3 15:11:07 2012
最近将前人的冻菌进行IPTG诱导,但我诱导3次结果都不一样
第一次结果:1mM IPTG诱导,5hr,37度 诱导成功,目标位子有很明显的band
第二次结果:1mM IPTG诱导,16hr,37度 control比诱导的表现高
第三次结果:1mM IPTG诱导,5hr,37度 control比诱导的表现高
1mM IPTG诱导,16hr,37度 诱导成功,目标位子有很明显的band
PS.3次冻管皆相同
另外我也有拿不同sample进行1mM IPTG诱导,5hr/16hr,37度
结果 control比诱导的表现高
另外.将一己定序确认无误之plasmid送至BL21 competent cell (实验室自行制备)
transformation後挑数个colony进行1mM IPTG诱导,5hr,37度
但跑胶结果发现,control竟然比诱导的表现高
请问是不是competent cell的问题???
或者蛋白表现过高,反而抑制了生长??
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.90.114
1F：推 crazybrian:重新transform看看~ 05/03 22:47
2F：推 satantaco:跑胶前的蛋白质定量无误?每个land的浓度是否一致 05/08 23:26