作者fablissful ()
看板Biotech
标题[求救] 有人分离过人类单核球细胞MNC吗?
时间Fri Apr 27 11:19:32 2012
因为实验上的需要
因此我需要抽取人血并分离其中人类单核球细胞 (MNC:mononuclear cell)
并配置condition medium
不过实验室里做过的学长姐都已经毕业很久 应该也忘记的差不多了
虽然看的protocol
不过实际上还是有许多问题不太了解
想请有经验的大大能够给我一点指点
如果可以是否可以告诉我你们当初是如何采血的?
一次都采多少去分离呢? 针头是用软针吗?
另外
因为单核球细胞属於悬浮性的所以用的flask是用一般的75T培养就好吗? 还是要co胶?
还有许多问题><
如果有大大愿意请多告诉我一点
感谢 (跪拜)
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◆ From: 140.120.104.95
1F：推 yllai1029:就用一般的针抽就好0.0我是抽一管10ml於Heparin管 04/27 13:51
2F：→ yllai1029:大概会有10^7的细胞数 不过我通常抽出来後就直接加药 04/27 13:51
3F：→ yllai1029:所以培养我不清楚 不过分离出来之後大概活不到一个礼拜 04/27 13:53
4F：→ melanoma:以Ficoll-Hypaque离心分离，取中间白色悬浮层分出再用pbs 04/27 21:50
5F：→ melanoma:以RPMI1640medium+FBS 培养 04/27 21:53
6F：→ melanoma:可悬浮培养，若培养後细胞有触手伸出代表已分化为DC或Mac 04/27 21:58