作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题Re: [请益] primary culture用的DNaseI
时间Tue Apr 24 00:21:11 2012
※ 引述《latte366 ( )》之铭言:
: 大家一般用量是每多少mg的tissue加多少量的DNase I去作用?
: 同样的作用原理用在cell line的culture应该也OK吧? 只是用量可以减少?
: 还有大家有买过哪家的比较便宜的吗? 价格/per unit
: 爬过文没有看到相关的资讯
我用sigma D4527,应该有更便宜的。
我觉得经验比你算半天还有用,如果过程没有伤到太多,我有遇过不加都可以过40um,
但有时太暴力,就算加两倍还有鼻涕XD
另外就是保存的问题,来回解冻或是配太久效力会下降,我第一次买新的用,
其效果之强令人惊艳,就算把量降到50%,都能在一分钟内把鼻涕给弄不见。
另外一个小插曲:D4527有说要二价离子辅助,但有一次我白目拿到有EDTA-trypsin
去处理tissue,不用说,鼻涕一下就堵住筛网了,就算我DNase加到两倍量都没用。
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起初,他们追杀共产主义者,我没有说话,因为我不是共产主义者;
接着,他们追杀犹太人,我没有说话,因为我不是犹太人;
後来,他们追杀工会成员,我没有说话,因为我不是工会成员;
此後,他们追杀天主教徒,我没有说话,因为我是新教教徒;
最後,他们奔我而来,却再也没有人站起来为我说话了。
《First They Came(他们首次来时)》,Martin Niemoller牧师(1892-1984)
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◆ From: 180.176.42.36
1F:推 aggaci:我从来没加过DNaseI trypsin那步温和摇晃即可 04/24 01:34
2F:推 latte366:感谢 不过我做primary glia cell culture加不加有差耶 04/28 22:17
3F:→ latte366:不过还是谢谢大家的建议 ^^ 04/28 22:18
4F:推 kattyhouse:谢谢L大~我终於找到我primary culture充满鼻涕的原因了 05/17 22:04