作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[求救] 请问如何在算细胞前把MEDIUM混均匀?
时间Mon Apr 23 21:46:07 2012
在取20ul到血球计数室前,如果细胞分布不均匀,取样自然不准。我除了pipet-aid
来回冲以外,在右手拿pipetman时也会用左手继续手动vortex,让medium有漩涡。
但有一次到别的实验室学另一种细胞的培养时,学姊觉得我算的细胞数异常低(34/一大格
),於是学姊帮我重算。前面也和我一样用pipet-aid来回冲,但最後是直接把离心管往
bench上下敲,而这次数目就正常多了,是我计算的4倍多(140/一大格)。
学姐是认为我的"手动vortex"并不会让细胞往上跑,还是会沉淀。要用敲的比较匀,
同时也认为沉淀其实很快,不用十几秒就往下面集中了。
不过这样的做法很容易让medium跑到盖子上,medium也容易起泡,我想请问各位
平常也会上下敲吗?有没有比较温和又可以混匀的方式呢?
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起初,他们追杀共产主义者,我没有说话,因为我不是共产主义者;
接着,他们追杀犹太人,我没有说话,因为我不是犹太人;
後来,他们追杀工会成员,我没有说话,因为我不是工会成员;
此後,他们追杀天主教徒,我没有说话,因为我是新教教徒;
最後,他们奔我而来,却再也没有人站起来为我说话了。
《First They Came(他们首次来时)》,Martin Niemoller牧师(1892-1984)
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◆ From: 180.176.42.36
1F:推 bbagels:纳闷+1我们是用锥形瓶养的,先取1ml,再取1ul去测 04/24 12:46
2F:→ bbagels:有一次数完觉得不可能这麽少,再取一次细胞数量差三倍... 04/24 12:47
3F:推 Realthugz:离心後用1cc回溶 pipetting後再取一部分出来稀释再算 04/24 21:58
4F:→ Realthugz:一大格一百多颗 sample多的话会数到天亮吧 04/24 21:59
5F:推 REIDO:1cc回溶会不会太少? 04/25 10:10
6F:推 tina731731:看细胞量多少 我也是回溶1cc後 取10ul出来稀释算 04/25 14:22
7F:→ tina731731:2x10^6 (cells/ml) 都还不算多 数细胞前取一点稀释 04/25 14:25
8F:→ tina731731:打错 是"7"次方才对 04/25 14:26