作者pelterl13 (memorize)
看板Biotech
标题[方法] 分析型超高速离心
时间Mon Apr 23 16:03:48 2012
最近样品送去做分析型超高速离心测试
得到的结果有点不甚清楚 想询问板上的板友是否有相关经验
我的样品是protein和人造的lipid vesicle同时上机
但是我的样品看起来其实还是澄清 但不是非常透明有一点白色
上机的分析结果是蛋白质有非常广的分布（200mega K左右）
结果也许是imply我的东西会跟lipid有interaction
我的推测是lipid本身不具有UV吸收因此看到的讯号应该的确来自於protein
但是我有个很大的问题
一般测UV吸收应该是要完全澄清透明(一般指的是加入了GdmHCL去做denature 在此没有）
如果有这麽大的分子量 那麽光的dispersion应该非常严重 超高速离心的UV分析是如何
避免这样的情况呢？
就我所知 分析型超高速离心似乎是利用超高速离心然後辅助ＵＶdetector去做 但是详细
原理不甚了解
而且因为我的sample已经是protein + lipiosome 肯定不会是完全的澄清透明（即使肉眼
不可见)
搜寻了网路上的讯息 实在是看不到直接性的资讯 希望有经验的板友可以告诉我一下
顺便再问一个问题 一般的UV detect是加入GdmHCL去做denature然後用吸光系数去定浓度
原则上除了280 nm以外 其他波长的吸收通常不太管他 其中320 nm通常可以用来监定是否
有气泡或者是不溶物 那麽如果我故意不加入GdmHCL 结果320 nm有吸收是代表甚麽呢？
打了很多 麻烦板友的帮忙了！ 大感谢！！！
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.44.48
1F：推 muscidae:实验前应该先确认只有单一种物质对280有吸光。 04/25 18:40
2F：→ muscidae:如果不行请换波长，不然就再跑两个cell 04/25 18:41
3F：→ muscidae:把蛋白质跟liposome分开跑，再把图叠在一起。 04/25 18:43
4F：→ muscidae:有时候非常广的分布也可能代表数种不同type在快速交换 04/25 18:44