最近打算做Protein Dot Blotting 在网路上找了一下~还是有许多疑问? 爬文也好像没有看到这方面的讨论 所以想问其他大大有没有完整的Protocol 目前找到的配方有 TBS:20mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH 7.4 TBS-T:0.05% Tween20 in TBS BSA/TBS-T:0.1% BSA in TBS-T 使用器具:Bio-Dot and Bio-Dot SF Microfiltration Apparatus membrane:Immun-Blot PVDF membrane (0.2 um) 目前比较主要的问题有 问题一. Immun-Blot PVDF membrane 在使用前除了用Methanol处理之外， 不需要再用buffer处理吗?? 问题二. protein sample 需不需要像在做WB那样加入Sample buffer然後100度，10分钟?? 如果需要那Sample buffer的配方是否一样? 目前找到的Protocol http://tinyurl.com/7bjgdg8 http://tinyurl.com/6ov5gv9 如果有大大能提供更完整更好的Protocol 麻烦请寄到[email protected] 请大大麻烦位小弟解答! -- 即使是钟楼怪人 也希望来一场像罗密欧和茱丽叶那样般的爱恋 --

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