作者bluce0225sky (呆呆)
看板Biotech
标题[求救] pET28已转殖基因系统更换至pET22系统
时间Thu Apr 5 16:03:11 2012
我先叙述问题原因
之前有先用pET28 vector成功转殖上我的目标基因
因为後续做时发现我的目标基因，为膜蛋白,必须要有特殊的信号序列
因此要把目标基因改接在pET22 vector上。
当初pET28在做时His tag是放在前端并且我的目标基因前面有一大段
不是该基因的序列,这样我能将pET28用酵素把我目标基因切下来,放入pET22上吗?
後续蛋白表现时我的目标基因前端的序列会影响到我蛋白表现吗?
或者还有其他更好的办法呢?
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◆ From: 140.130.176.215
1F：推 icome:singal peptide是真核细胞的东西 对E.coli而言没有特殊意义 04/05 18:59
2F：→ icome:打错 signal 04/05 18:59
3F：→ icome:还有 膜蛋白建议去掉transmembrane region否则容易变不可溶 04/05 19:00
4F：推 darit:原核细胞也是用的到signal peptide 04/07 13:24
5F：→ darit:如果你要表现在periplasm的话就需要 04/07 13:25