作者windyflyer (缓慢。等待。)
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标题[求救] 细胞一直一直一直污染...
时间Sat Mar 31 14:49:42 2012
谢谢大家回覆，昨天跟实验室学长说好也请大家把细胞先移到其他LAB的INCUBATOR，
接着就是把所有能拆的架子固定条全部拆下来之後酒精先喷一遍+清洁剂再擦一遍接着拿
去照UV一整晚，incubator则是用酒精+清洁剂擦一遍。
之所以会想试着用抗生素杀是因为那时候不管清hood+所有能换新的东西都换新，这东西
还是一直一直出现....才因此有这想法。原本也是采用一发现可疑漂浮物就丢掉细胞，
但是这东西一直出现导致实验室液态氮桶细胞快绝种了...询问隔壁实验室大学长得到以抗
生素杀死污染的结果才会想说试试看。
至於这污染，发生的时间点大约是在实验室新进学生开始学养细胞那段时间开始的....
反正，不管怎麽样，我尽力解决了。剩下的....
有人的地方，就有一堆茶包(茶)
最後还是谢谢大家提供的意见，受益良多!!
最近细胞一直一直一直污染...而且目前没有找到可以杀死他的抗生素Q_Q
连隔壁实验室非常强的抗生素都没效 囧
他一开始是很像FBS渣渣的短小长条，很容易被忽略。但过了两三天在看，会发现他变长
了!!再放个两天，会发现它变多了!!!!接下来就是塞满整个视野....
可是很奇妙的是，他不会让MEDIUM浊掉，细胞也不会死。隔壁实验室大学长看过之後说是
杆菌类的东西...但是目前加过各种抗生素(Kanamycin, puromycin, 还有隔壁实验室用过
说赞效果超强的抗生素)都没用...照样开心的生长。
这东西好像会黏在dish或细胞上，单纯吸掉medium是冲不掉这些东西的，不过用PBS，
micropippet朝着细胞冲下去能把这些东西冲掉(只是如果细胞贴附力不强就跟着一起流掉
了..)，但是他还是会继续长= =
最近又发现除了单条长条状之外的型态：他会好像从一个中心分岔长出去的样子。
请问有人知道这是什麽吗？....这东西困扰我超久>"<
每次挑stable clone都毁在他手上，我快疯了啊!!!
另外就是有没有什麽方法可以杀掉这些鬼东西？我已经丢掉好几盘细胞了.....
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.174.188
1F：推 eric00142002:怎麽感觉很像是我们实验室以前发生过的，那时是yeast 03/31 15:57
2F：推 ChesterYeah:酵母菌会浊~觉得不用救了 直接丢掉 03/31 16:47
3F：→ ChesterYeah:清洁卫生程序做好比较重要 03/31 16:47
4F：推 aceliang:救细胞干嘛？全部砍掉重来比较实在。 03/31 17:57
5F：推 chosenone:真菌? 03/31 18:29
6F：推 czyangshoo:zeocin试试看 03/31 18:31
7F：→ g010377:与其花时间找哪边出问题 倒不如狠下心全部砍掉全练 03/31 18:36
8F：→ g010377:laminar flow和culture room全部大消毒 03/31 18:37
9F：推 st92013:真菌污染 incubator内部都要拆掉灭菌.擦拭 03/31 19:34
目前都是一发现有，就算只有一点点也是丢掉，但他还是一直出现...
之前清过HOOD，不过还是有。下一步有要清incubator了..学长说等这批药筛完再说= =
(因为我目前在筛的药有一个气味之浓烈已经薰满整个incubator了，他想等筛完再清，
说不然清完还有那个味道他会崩溃 囧>
我想请问清完之後有没有什麽方法可以预防的，例如水盘加抗菌剂(老师那边好像有，
跟他拿来家看看)之类的...
实验室的incubator水盘always乾涸，我想说自己辛苦一点来维持好了..总不能都摆烂吧
= ="
最後谢谢大家回应!!我只是想知道那到底是什麽超难搞又一直出现，没这东西我的stable
clone出来三次了啊啊啊啊啊啊(暴走)
※ 编辑: windyflyer 来自: 111.254.223.221 (03/31 20:16)
10F：推 icome:细胞污然怎麽办? 唯一解:砍掉重练 03/31 20:17
11F：→ icome:incubator用来苏擦 蛮有效的 03/31 20:19
12F：推 Realthugz:fungus? 04/01 02:15
13F：→ Realthugz:大家都觉得是fungus.... 你还在杆菌... 04/01 02:16
14F：推 tsubasawolfy:水盘都乾掉里面温度无法均匀还养的下去... 04/01 07:53
15F：→ tsubasawolfy:还有要不要拿你的一点dna加到乾净medium里面培养看看 04/01 07:54
16F：→ tsubasawolfy:不过照理说还要一盘serum free medium一盘PBS一盘有 04/01 07:56
17F：→ tsubasawolfy:serum的medium.一直污染就要trouble shooting, 埋头 04/01 07:58
18F：→ tsubasawolfy:苦干就算最後杀掉那些污染 筛出来的细胞也不会是你想 04/01 07:58
19F：→ tsubasawolfy:要的 04/01 07:58
20F：推 chench0710:对阿说不定是PBS 或medium之类的被污染了 04/01 11:15
21F：推 joseph103331:别等了....拖也是拖你自己的时间罢了 不如赶快解决 04/01 11:15
22F：→ joseph103331:再重新来筛 04/01 11:15
23F：推 kakaman:整批换新的比较快... 04/01 12:25
24F：推 Realthugz:不会troubleshooting 这个硕士学位拿到也是废的 04/02 02:22
25F：推 chosenone:楼上也不必这样 很多实验上要抓问题是靠经验的 拿到学位 04/02 10:26
26F：→ chosenone:之後再久 做新的实验时也可能很久抓不到问题 这样就觉得 04/02 10:27
27F：→ chosenone:学位废的也太快了点 去请教一个只有没拿到MD和PhD但做这 04/02 10:28
28F：→ chosenone:个实验有多年经验的人反而快很多 04/02 10:29
29F：推 Realthugz:经验当然很重要 没经验的时候就是从基本shoot起 04/02 11:23
30F：→ Realthugz:基本动作都做了还是有问题也不是不会发生 04/02 11:25
31F：→ Realthugz:但这篇是类似暴力破解阿 04/02 11:25
32F：推 lyu0001:细胞培养应该是最简单的技术，该不会是新手。 04/02 11:53
33F：推 joseph103331:加抗生素想杀死污染源的做法真的不太好 不如是在重配 04/02 18:29
34F：→ joseph103331:与重新养的medium中加入抗生素还比较好 04/02 18:29
35F：→ joseph103331:有很多抗生素都只是抑制生长而已.... 04/02 18:30
36F：推 mesenchymal:同上,抗生素抑制生长让你没注意,发现时就是没效爆发了
※ 编辑: windyflyer 来自: 111.254.212.86 (04/03 21:57)
37F：推 icome:不加P/S反而不容易污染 因为一有污染马上就会知道 04/04 00:43
38F：→ icome:加了往往只是掩盖污染的事实 就像抹了浓妆的女人不知真面目 04/04 00:44
39F：推 Realthugz:几乎没再用PS+1 04/04 03:00
40F：推 ararthur:我觉得是DNA脏 04/12 01:02
41F：→ hahaiamweiwe:你有提到水盘时常乾固,那就是因为水盘乾了水中的水霉 04/15 21:40
42F：→ hahaiamweiwe:随着循环被吹入DISH中,这问题我遇过很多次,後来维持 04/15 21:41
43F：→ hahaiamweiwe:水盘的水量且定期更换就没再出现过成丝分岔状的霉菌 04/15 21:43