※ 引述《yak138 (yak138)》之铭言： : 各位好~ : 最近利用JC-1来染mitochondria的时候遇到一些问题 : 在将JC-1由stock solution (溶於DMSO) : dilute成working solution的时候 (溶於medium或PBS) : 发觉溶解度很差 既使vortex过後 仍然可以看到许多不溶解的颗粒 : 加上所观察到的染色结果不是很好 推测可能染剂无法进入细胞内 : (用的sample是单细胞藻类) : 不知道有没有这方面有经验的人 可以给小弟一点建议~ : 谢谢~ 我目前也在使用JC-1这个染剂 不过使用CCCP (附赠的positive control) 做了之後 发现绿光及红光均减少(我使用的方法是流式细胞仪) 而没有protocol所说的绿光增加 红光减弱的现象 虽然我查到有些paper是写红光减弱 绿光不变但是我的两种波长的光是都减弱==" 无意中看到这篇的推文想说有没有可能是因为绿光degrate掉了? 我从染色开始的protocol大概是: 染JC-1 37度 35mins => wash 一次 => 用PBS回溶入flow管中 当中离心机我是设定4度C 回溶之後flow管也是插在冰上直到上机 请问一下这过程中有问题吗? 还是因为我手脚太慢? --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 218.173.111.204