如果UV坏了, 你看到的是平的UV line, 杂讯这麽大,就我所知有两各可能的原因 1. 你的column进空气了; 2. flow-cell很脏 (请熟析FPLC的同事还是朋友帮你处理一下) 我看起来你的sample都没有进去column, 反倒是空气进去了 诚心建议你, 找附近实验室有没有人熟悉FPLC的,直接示范一次 ※ 引述《betouched (上上下下)》之铭言： : update 资讯与方法,我的FPLC都没有出现peak 不知道问题在哪里 : 用打的描述方法有点困难,所以我将照片上传到dropbox : http://0rz.tw/lHY8Y 这是我打出来的图,UV是那很杂的那条,杂讯很大,没辙 : http://0rz.tw/oCOoA 方法前半段 : http://0rz.tw/YoFue 方法後半段 : http://0rz.tw/aQpOI Gradient 曲线 : http://0rz.tw/hVfWp 前人留下来的图,打出来应该要长这样 : 我是在run方法之前.就先inject sample : 我手动将 injection valve 转到 inject 然後打1ml 0.2mg/ml 的sample : 再转到 load 然後按下 run : ps.由於实在都没有peak 所以我连,先 load 在 inject 都玩过了 : Setup Lamp Run Time 显示 : Hg 22218h : 其实我一直认为是 Lamp 问题,使用说明书上写的是 run time : 我的认知是,灯泡使用时间,所以我认为Lamp已经该换了 : 可是我这边的博後 : 坚持说他之前才换过,那是倒数时间 : 这个博後,我真的有说不完的想骂他的话 : 觉得还是自救比较快 : 使用的仪器 : Pump P-920 : UPC-900 : ※ 引述《betouched (上上下下)》之铭言： : : 之前用FPLC的学长姐不见了之後我才进实验室 : : 现在一个人在努力学习怎麽用这个仪器 : : 仪器 AKTA FPLC : : 软体 Unicorn : : Column : resource Q 1ml : : Method:沿用前人的 method : : 1. wash by water : : 2. wash by protein solution AB for 20 min : : 这期间我用 protein solution A 洗了 sample loop (2ml) : : 然後 inject sample into sample loop for 1 ml (0.25mg/ml) : : 有确定此时 InjectionValve 是block住的 : : 3. injection : : 这里萤幕上显示不是很明了 : : 0.02min InjectionValve inject : : 0.02min Block Sample_Injection : : 0.02min Base Volumn : : 2.02min End Block : : 2.02min InjectionValve Load : : 2.02min End Block : : . : : . : : . : : 4. Gradient B from 0-100% for 40 min : : 标准品应该在20分钟左右出来<可是UV还是保持在0上下跳动 : : 5. 哭哭 : : 一个人看着 FPLC 使用说明书,东弄弄西弄弄得,真是头大,来个人帮帮我吧 哭哭 : : ◆ From: 147.126.101.168 : : 推 bluep:简述一下你的column和method, 大家才有办法帮你找问题 03/16 14:32 : : 推 iosteven:这一台操作 很简单= ="你的动相 梯度 方法 跟目的等资讯 03/17 13:39 : : → iosteven:要说明白才可以帮你^^，基本上设定好固定时间收吸收峰 03/17 13:40 : : → iosteven:的样品，是最简单的目的，是要纯化或分Fraction..... 03/17 13:41 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 163.1.130.189