作者VieraWei (virgin)
看板Biotech
标题co-IP的control组疑问
时间Tue Mar 20 12:26:54 2012
各位版上的学长学姊好，
我最近要用millipore的catch and release v2.0 system进行co-IP的实验。
想请问版上的学长姊，我的control应该怎麽做比较好呢？
目前我的想法是：
(1) 未经IP的sample：作为loading control，确定IP lane之target protein的位置；
(2) 未加入sample之IP mixture：含affinity ligand与antibody，
确定affinity ligand与heavy chain/light chain位置；
(3) 未加入antibody之IP mixture：含sample与affinity ligand，
确定IP组别中看到的target protein确实是经antibody specific binding而来的。
请问各位学长姊，这样的control够完整吗？是否有需要再加入什麽组别呢？
另外想请问，有些做co-IP的paper中有IgG control，
请问IgG control是什麽呢？
不好意思问题有点多...恳请版上的学长姐赐教，感激不尽！
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◆ From: 140.116.253.121
1F：→ blence:一般非kit不会用(2),至於(3)则是加入normal IgG而非Ab未加 03/20 12:44
2F：→ blence:normal IgG或IgG control指的是拿non-specific Ab做为对照 03/20 12:45