作者lovenainai (lovenainai)
看板Biotech
标题Re: [闲聊] SDS-PAGE可以配两个不同浓度替代梯度吗？
时间Tue Mar 6 19:38:31 2012
事实上完全不需要一层一层的压平
直接配好五种不同浓度的下层胶 15% 12% 10% 8% 6%
TEMED 一次加一管 迅速 pipetting 两次 依序 load 1.5mL 进去
切记不要 vortex 然後动作要快 一次做四块胶没问题
事先玻璃擦乾净一点 手脚快一点 不会有扩散不均匀的问题
※ 引述《LIAR (玻璃做的大叔)》之铭言：
: 就是如果同时要分大分子和小分子的蛋白的话，通常要跑梯度胶。除了premade，
: 自己配就要有特殊的装置，一个没弄好，还没加到电泳片就凝固了。我突然想到
: 能不能separating gel就配两种浓度，譬如下面先加一半的20%，同样先压平，
: 但第二步不是stacking，而是8%的separating gel，之後照旧。
: 这算是我的异想天开，虽然没试过，不过大家觉得可行吗？
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◆ From: 24.184.89.77
1F：→ westterry170:想请教一下为什麽不要vortex@@" 03/07 00:28
2F：推 jabari:铸胶就像盖房子.. vortex就像大地震..XD~~不过我用strife@@ 03/07 01:38
3F：推 REIDO:加进玻璃"前"不要vortex吗？应该不会有人整片玻璃vortex吧？ 03/07 15:05