※ 引述《lyu0001 (echoli)》之铭言： : 最近在纯化his-tag蛋白质，将含有500 NaCl及20mM PBS的蛋白质溶液保存在-20度， : 隔天发现有很多白色沈淀，有上网找过液态氮急速冷冻法，或是加入glycerol（不喜欢） : ，请问大家都如何保存蛋白质？ 这真是大哉问啊! 我的老板也常问我为什麽蛋白质又沈淀? 我都毕恭毕敬地说: "影响的因子有很多, 例如...., 所以我会再试试看条件!!" (其实心里的OS是:XD谁知道哪个条件会沈淀啊?你也不知道怎样好啊!!) 但至少有一句不是废话, 就是"试了就知道" 通常我会先试buffer种类(PBS, Tris, HEPEs) 然後试盐类浓度(100mM~500mM NaCl, 100mM为梯度) pH也应该试(这因子其实最重要) -------------------------------------------- (以下懒人作法, 最好不要学) 但是因为很懒惰同一种buffer配很多pH和盐类浓度 所以我都是在两管蛋白中分别往上滴硷和往下滴酸, 或者往上加盐类浓度(5M NaCl往eppendrof里滴定) 看何时会变澄清. -------------------------------------------- 如果浓度不需要太高就不要浓缩太浓 如果4度C很稳定也可以不用冷冻 如果要冷冻液态氮和-80度C会比-20度C好 如果要测activity assay或者解结构, 我也不喜欢加glycerol 如果有好方法欢迎提出来讨论 如果有一种公式可以看序列就知道何种buffer条件适合就太好了!! Oh Yeah!! --

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