作者raiyu (ラルクは信仰)
看板Biotech
标题[讨论] 跑WB的蛋白质样品-20可以保存多久?
时间Mon Jan 2 00:21:13 2012
想请问一下 大家的样品sample buffer处理後
通常冰在-20可以保存多久??
另外通常可以结冻解冻几次??
因为最近WB一直作不出来
同样的sample 之前都还跑得很清楚
但最近(12月) 不论transfer o/n
重配1抗2抗 或 1抗 o/n
甚至loading 100ug 去跑 还是跑不出来
不论是磷酸化的蛋白或是total的都跑不出来
都快去撞墙了
WB作不出来的可能原因实在太多了
想请问大家的经验
希望能稍为排除一下可能原因
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.77.65.129
1F：→ a001ou:通常我放3个月就会明显感受到讯号减弱 但有神人一年样本 01/02 01:38
2F：→ a001ou:跑起来还是很威 只能说看个人 01/02 01:39
3F：推 dodomilk:每一部作control试试看原因吧 最近还碰过机器坏掉的 01/02 06:56
4F：推 owl628:想顺便请问大家,大家觉得protein用SB处理过後保存比较好,还 01/02 11:39
5F：→ owl628:是直接冻在-80,要跑WB前再用SB处理比较好,谢谢~ 01/02 11:40
6F：推 martyrtitan:SB和加热处理後 protein都变性 而且如果有加inhibitor 01/02 13:50
7F：→ martyrtitan:理论上是还满稳定的... 01/02 13:50
8F：→ martyrtitan:我现在是先定量一批跑internal control 01/02 13:50
9F：→ martyrtitan:如果没变 那我就分管以sample buffer处理後冰-20 01/02 13:51
10F：推 huhu126:有没有一个确定的positive control可以用? 01/04 00:24
11F：→ huhu126:另外,是只有你或是少数人做不出来,还是所有人都这样? 01/04 00:29
12F：→ huhu126:是的话,check一下2抗及substrate 01/04 00:30
13F：推 lovenainai:加laemmli buffer煮过之後放-70至少可以放一年 01/05 03:04
14F：→ raiyu:了解~ 谢谢各位的回答 01/05 08:50
15F：推 windyflyer:可以藉标题问SB是啥吗@@? 01/06 17:48
16F：→ raiyu:SB=sample buffer 01/06 18:53