作者unwell ( )
看板Biotech
标题[求救] MTT assay 处理组数值高於控制组
时间Thu Dec 29 17:15:08 2011
已经爬过文了没看过有人问
请教板友
我做的试验是在caco-2贴附後 加入某药品进行攻毒
另外添加两个菌数的某菌
想看该菌可否使药品对caco-2的伤害降低
结果
control是没加药品也没加菌 OD值平均视为100%
只加药品组OD值是控制组的80% (嗯 还OK)
重点来了
只加
低菌数某菌组OD值居然是control的
200%!!
我想说 会不会是caco-2跟菌之间有吸附的关系 所以测MTT时也同时测到菌了
但在只加
高菌数某菌组OD值是control的120%
而在药品与菌共同treat下则都低於100%
呜哇我该如何解释
MTT assay结果 实验组比control还高呢?
甚至达到200%???
补充
1. 96-well 细胞数: 2x10^4/well 100 μl/well
2. 因为有菌的处理 反应时间设定只有12h
3. 在加入MTT之前 有用200 μl PBS wash 2次
4. triplicate, standard error挺小的
谢谢各位了~~~
※ 编辑: unwell 来自: 140.112.154.104 (12/29 17:17)
1F：推 mesenchymal:MTT 12hr会不会太少了? 12/29 17:21
2F：→ unwell:我是逼不得已 放到24H菌长超快细胞会死 是可以再微调看看 12/29 17:27
3F：推 FireHell:加入MTT之前不可以用PBS wash，会把酵素洗掉 12/29 17:47
4F：→ FireHell:很多人会犯这个错误 12/29 17:47
5F：→ unwell:MTT是加在medium里处理细胞反应4h 不是测那4h产的酵素? 12/29 18:25
6F：→ unwell:如果会洗掉酵素 那吸掉medium那步时不就也吸掉酵素了??? 12/29 18:29
7F：→ unwell:谢谢大家的回应 12/29 18:29
8F：推 icome:要测的dehydrogenase在mitochondria 不会被洗掉 12/29 18:40
9F：推 aceliang:是测MTT被mitochondria的reductase还原後变成的formazan 12/29 20:05
10F：推 natual:楼上正解..请各位仔细去看MTT原理 12/29 23:07