作者aken740127 (~^0^~)
看板Biotech
标题Re: [求救] cleavaged Caspase3的western
时间Wed Dec 14 15:36:33 2011
感谢各位板友提供意见
这礼拜的caspase 3 (17 kDa)已经有结果了
在这里把我改的条件po出来给有需要的人参考
protein loading: 150 ug
将PVDF membrane裁开区分pro-caspase 3 (35 kDa)及active caspase 3 (17 kDa)
blocking: 5% BSA in TBS 4度C o/n後将BSA吸走(re-use), 不进行wash直接加1x TBS
1'Ab: rabbit anti pro-caspase 3 (#9662, cellsignal) 1:500 4度C o/n
wash: 0.1% TBST 15 min 3次
2'Ab: anti rabbit 1:2500, 室温一小时
wash: 0.1% TBST 15 min 6次
ECL呈色
出来的band很清楚 background也蛮乾净的
再次感谢各位板友提供的意见~~~<(_ _)>
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