作者VieraWei (virgin)
看板Biotech
标题[求救] 关於denature protein的方法
时间Mon Dec 5 11:12:08 2011
各位版上的学长学姊们好,
小弟最近要进行IP的实验,
我找到的抗体只能辨识denatured form的protein,
所以在进行IP之前,我必须要确保protein已经被denature了。
小弟用的sample是tissue的lysate,
在homogenize的时候是用RIPA lysis buffer,其中含有0.1% SDS,
想请问这样的情况之下可以确保protein被SDS denature吗?
如果不行的话,请问有什麽方法可以将lysate中的protein denature呢?
google了一下好像没有找到相关的protocol,
麻烦版上的学长姊帮忙解惑,小弟感激不尽!
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.121
1F:推 joseph103331:你是要做protein-protein interaction还是修饰? 12/05 11:36
2F:→ joseph103331:pp interaction不能让他们denature喔.... 12/05 11:36
3F:→ joseph103331:真的找不到就建议你用fushion protein来做吧 12/05 11:37
4F:→ joseph103331:至於denature protocol有些IP的有写 再找找看 12/05 11:38
5F:→ turtle24:抗体加下去也会被denature吧 先透析说不定会折叠回去 12/05 17:01
6F:→ turtle24:换个抗体会不会比较容易设计实验? 12/05 17:02