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如题 本来我们家的Trizol都是抽RNA用 (废话..= = 最近刚好有要抽rat cultured cell的DNA 因为刚好说明书里有说可以~ 就顺道想说试一次也好 前半部到phase separation为止步骤都跟抽RNA时一样还没啥问题 重点是...分层之後 (尽量的拿掉最上清液後) 它说要加 100% ethanol 可是我们之前买的实验用酒精都是写99.99% 这样应可以吧!? 接下来DNA Wash 就更雾煞煞了 首先是wash solution的配制 它说要0.1M sodium citrate in 10% ethanol 问题是...那10% ethanol是溶在?? 水里吗? 然後更不幸的 我们实验室没有sodium citrate... 这个Wash solution有没有其它配方可以代替呢?! 然後溶出DNA是用8mM NaOH~ 给个大约量是用300~600λ per 不同细胞来源 这边没什麽问题! 最後一个是保存方面 说明上有写说 for prolonged storage, samples should be adjusted with HEPS to pH 7~8 and supplemented with 1mM EDTA. 後面EDTA那句我看不是很懂... 因为照上段讲的~ 用NaOH去溶 要保存用HEPS去调pH值 这还能理解 可是加EDTA....是要怎麽加才能变成1mM ?? 因为到这一步为止 tube管子里的体积已经有NaOH跟HEPS了 因为总体积都是λ等级了 如果要算出终浓度是1mM的EDTA 这....也太微量了吧 = = 且EDTA应该也是先泡成solution再加进去 我不太懂到底是上面我标黄色字那一行字的意思到底是.....啥意思!? 虽然知道用Kit比较快 但目前就是刚好没Kit... 谢谢大家看完 = = --



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◆ From: 140.116.243.66
1F:推 Realthugz:那就别加EDTA阿 11/21 19:55
2F:推 aceliang:阿不就stock 11/21 20:26
3F:→ aceliang:ethanol就用无水酒精罗 11/21 20:27
4F:→ keepseaching:要长期保存才需调pH值与加EDTA 11/21 22:45
5F:→ keepseaching:Wash那一步建议还是用sodium citrate会比较好 11/21 22:46
6F:→ keepseaching:Wash buffer的配法是用水溶没错 11/21 22:49
7F:→ keepseaching:若需更多协助可以寄信给我 11/21 22:50







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