作者pocession (阿宗)
看板Biotech
标题Re: [求救] 用旧的agarose gel跑RNA
时间Sun Nov 13 00:28:12 2011
※ 引述《rockerwei (才女)》之铭言：
: ※ 引述《pocession (阿宗)》之铭言：
: : 嗯 可能我的意思让你有点误解
: : 要跑RNA Marker的原因有两个
: : 一个是DNA的分子量没有办法代表RNA (DNA为双股，RNA为单股，单体的分子量也不一样)
: : 另一个是确保你在SAMPLE prepare或是跑胶的过程中RNA没有分解
: : (如果跑胶的流程中出错，RNA marker就会分解了，以此作为判断)
: : 所以你用DNA marker作比较，是没办法作任何判断的
: : 另外，根据我的经验，胶的新鲜与否并不是很直接的影响
: : 主要是跟你放置的容器和跑胶的buffer有很大的关系
: : 容器要乾净，跑胶的buffer尽量灭过菌，然後要跑时再稀释(要用二次水)，
: : 如果要把RNA sample作变性处理
: : 可以自己配制含formaldehyde的loading buffer就好了，满便宜的
: : 如果不想买RNA marker，可以自己用acid phenol抽新鲜的大肠杆菌(养至对数期的细菌)
: : 里面会有5S, 16S, 23S；可以帮助你判断位置和跑胶流程有没有发生问题
: 再求救一次~我这次已经用新的buffer跑了~可是还是没有18S和28S的band
: 我在想是不是配胶的问题
: 因为我是直接拿DNA的agarose gel来跑
: 请问大大们
: 有没有配RNA gel 的配方~~
我觉得现在解释太多背景知识可能对您没什麽帮助
先把结果(胶图和od值)传上来
应该就能找出问题了
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