※ 引述《rockerwei (才女)》之铭言： : ※ 引述《pocession (阿宗)》之铭言： : : 嗯 可能我的意思让你有点误解 : : 要跑RNA Marker的原因有两个 : : 一个是DNA的分子量没有办法代表RNA (DNA为双股，RNA为单股，单体的分子量也不一样) : : 另一个是确保你在SAMPLE prepare或是跑胶的过程中RNA没有分解 : : (如果跑胶的流程中出错，RNA marker就会分解了，以此作为判断) : : 所以你用DNA marker作比较，是没办法作任何判断的 : : 另外，根据我的经验，胶的新鲜与否并不是很直接的影响 : : 主要是跟你放置的容器和跑胶的buffer有很大的关系 : : 容器要乾净，跑胶的buffer尽量灭过菌，然後要跑时再稀释(要用二次水)， : : 如果要把RNA sample作变性处理 : : 可以自己配制含formaldehyde的loading buffer就好了，满便宜的 : : 如果不想买RNA marker，可以自己用acid phenol抽新鲜的大肠杆菌(养至对数期的细菌) : : 里面会有5S, 16S, 23S；可以帮助你判断位置和跑胶流程有没有发生问题 : 再求救一次~我这次已经用新的buffer跑了~可是还是没有18S和28S的band : 我在想是不是配胶的问题 : 因为我是直接拿DNA的agarose gel来跑 : 请问大大们 : 有没有配RNA gel 的配方~~ 整个流程就是抽完RNA然後我拿5ul去跑胶 大概是100v 抽RNA的流程就是用组织研磨器加上Tri-zol(3ml)放在50ml的tube里面打碎 再加入1ml的chloroform~然後votex再分装到eppendorf里面~ 等五分钟~在离心12000rpm 10 min 离心後取上清液 加入isopropanol等30min 离心12000rpm 30min 用DEPC-EtOH wash 离心12000rpm 10min 吸乾酒精~加DEPC-H2O 然後就测浓度~跑胶~~~ 我真的不知道发生什麽问题 --

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