作者UNOMISAKO (UNO AAA)
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标题Re: [讨论] 为什麽HPLC要加低浓度蚁酸或乙酸
时间Sat Nov 5 00:54:05 2011
※ 引述《e5f6 (Youkon Disc)》之铭言:
: 我找了好多的PAPER的HPLC条件
: 所有BUFFER里面都会加0.01%的蚁酸或是乙酸
: 可是我真的查不到原理
: 没加会怎样吗?会损坏COLUMN吗?
我猜可能是用reversed phase column ,C4、 C8、 C18、CN、phenyl这种的吧?
加formic acid 或是acetic acid 或TFA都是为了呈现酸性而已
有两个原因
1. column里中silica是怕硷,所以流经的solvent必须至少是弱酸性
但这个原因也不是适用在各家各column,很多厂商有出可以耐pH很宽范围的column了
2. 分析物的电荷稳定
像COOH,NH4+,让化合物的电荷稳定,以大部分常出现的group中
用酸性是适当的,万一有相当量的COO- 、NH3和他的COOH、NH4+共存的话
会看到图中一个peak的顶端,有分成两个小山坡,好像叫peak splitting?
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◆ From: 111.240.103.43
1F:→ TauriCrab:1.看管柱说明书 2.看化合物的pKa值 11/05 02:40
2F:推 e5f6:\谢谢解说!!刚查过管柱可耐酸 11/06 12:05
3F:→ muchmoa:有时是为了ion pairing或接MS时帮忙带电荷 11/06 22:06