我们lab的lung cancer cell lines一直频频有问题 一开始是把所有的lung cancer cell lines抽DNA送STR 结果竟然没有Human的 这可有问题了~ 不管送几次都没有human 可是,我们的lung cancer cell lines是几年前从别人家来的 偏偏那别人家去送STR每个都正常 冏 (我们家还有好多其他的不同种的cell lines) 在这情况下 只好全丢光lung cancer cell lines 重新要一次 第一次 寄来--> passage --> yeast污染 (medium用commercial) 第二次 寄来--> passage --> yeast污染 (这次避免是我个人污染问题 也换个人接手,由於对方是用flask寄来,medium很满,接手的人 还把多出很多的medium吸到新的50mltube,然後长满的细胞 就passage到10cm dish,用对方寄来多的medium,结果有passage 的细胞都污染,唯一一盘没passage但是有换medium的cell line没事) 第三次 寄来--> passage --> yeast污染 (这次又换回我接手,因为已经要三次了,为了确保,每次处理cell lines之前 我都会让所有的东西照UV最起码30min以上,还戴了手套,酒精也狂喷,还换了罐 新的commercial,medium还分装到 50ml tube,结果还是污染, 难道是dish比较 容易污染吗? incubator我放在最底下那层靠近门会有关西吗? 同时 我们也都有keep其他不是lung的cell line可是就都没事) 已经要了三次都污染~这真的是很大又尴尬的问题,版上有说用抗生素洗 或一直用PBS Wash,有人试过真的能移除吗? 还有yeast是手上带进去的吗? 现在真的一个头两个大了~ 希望大家有任何想法都可以讨论看看,谢谢了!! --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.123.85.163 m大,你是说他们寄来的medium分别放在flask和dish各放一盘试试吗? R大,可是incubator里还有lab其他人养的也都没事,不过只有我放最下层,但是我 也还有其他的cell line在养,可是也没事,serum 我也是拿新的!! 不过我还是会试试 commercial的medium有没有污染 洗澡? 没有阿...一早就到LAB了 ,有常常洗手,酒精也用很勤耶!! 我是incubator有换过底下的水盆也换过新的药剂~但是要是全污染不应该只有那几株 lung的,应该其他的也会多少影响! 这就是最不懂的地方了 >"< 有耶~ 就是我自己养的3T3L1 还有其他有人实验用的24well plate 大家都怎麽清理incubator呢? 我们上次那次污染时除了水盆全换,还有喷的清洁剂也用, 酒精也喷过,还有用Formaldehyde薰o/n,还放两天循环,结果重新放回去养,每个细胞都 长的极差,大概是Formaldehyde效果太强大了 感谢大家这麽热心的提供想法, 不过Laminar flow有没有污染我就不知道了~不过 我们家的laminar flow & incubator都同一台就是!! 我今天有重新擦过incubator,也 有换过水盆还有加上抗菌剂,还把cell 放在比较里面没靠近门(不过都还在最下层就是) 也有把原来送来多余的medium 放在 flask,10cm dish, 3cm dish观察了,希望有大家 的帮忙,我的细胞可以好好乖乖的不要在跟yeast牵手做好朋友了>< 有好结果再来 告诉大家~谢谢大家~下台一鞠躬!! ㄟ~PBS我都没想到耶@@ 不过大家都用同罐PBS,其他人没事,应该就不是吧!! ※ 编辑: mango1986 来自: 140.123.85.163 (11/03 11:23)