作者diamondcrazy ()
看板Biotech
标题[方法] transwell步骤与insert里细胞染色方法
时间Wed Oct 26 16:59:25 2011
如题
最近老板请我用tumor cell line 跟HUVEC做co-culture
希望看看HUVEC在co-culture下的生长情形会不会有所改变
由於从来没做过co-culture实验,但我找到一篇paper里刚好有符合我们要的实验方法
J Cell Sci. 2003 Mar 15;116(Pt 6):1013-22
里头提到的Net-like formation可以观察huvec养在insert里在co-culture下生长情形
一样是用transwell做实验
我想请问有做过transwell的前辈们
在放细胞时,若使用的medium两只细胞都可以养的前提下,要在怎样的顺序下seeding细胞?
1.先各别在chamber seeding tumor cell, insert seeding huvec
隔天贴了以後再把insert直接放在chamber上culture 48hr?
2. 直接把悬浮状态的tumor cell丢入chamber後,把insert放上,再丢入悬浮状态的huvec
然後culture 48hr?
然後我很疑惑的是里头提到染色部份,请问有前辈分享一下insert里细胞染色除了paper里
提的公司还有哪些公司生产的染色kit比较推荐吗?还有这类的染剂是不是花费的时间都很
短啊?
最後一个问题....有辈也有做过类似的实验吗?能否讨论一下,没做过很怕东西买回来出包
谢谢!!
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◆ From: 140.112.133.222
1F:推 hchung:先分别seeding,ON後再coculture! 10/28 02:43
2F:推 hchung:通常co culture会用serum free medium 10/28 02:50