作者a213a21 (a213a21)
看板Biotech
标题[求救] acridine orange 染色
时间Tue Sep 6 12:33:31 2011
最近用了acridine orange(AO) 来染 acidic vesicular oranganelles(AVOs)
但染完後在显微镜下只看到细胞全被染成红色
都无法看到明显的AVOs
因为实验室没人做过这个染色
protocol也是google查到的
我的做法是
先用 4% parafarmaldehyde 固定细胞30分钟
PBS 润洗後再用 0.1% TritonX-100 作用5分钟
PBS 润洗两次後
用 AO (5ug/ml) 染色10分钟
PBS 润洗五次後在染DAPI
最後拍照
想请问板上的高手们 这个作法有甚麽地方需要修正的
或是可以分享一下方法
一直失败真的很闷阿~~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.13.115.17
1F：→ genep:很久没做,印象中不用固定也不用打洞,1 ug/ml,15m, RT. 09/06 22:49