作者xenograft (努力尝试学以致用中)
看板Biotech
标题Re: [求救] MDCK cell泡在PBS中脱落
时间Thu Sep 1 13:17:54 2011
(原文恕删)
我之前有遇过类似的问题
但那时是我一次做12盘而且技术还不太熟练的时候发生的
当时我们推测原因是因为泡在PBS中过久(大约十分钟左右)
那後来因为这个原因我改成一次操作6盘
我的作法跟你不太一样的地方是
我以6盘为一组,将6盘的medium一起移除後再一起加入PBS
所有的动作都以一组为单位操作
由於是用玻璃试管移除
所以细胞表面还会有些许残留的液体不会造成细胞乾掉
那目前至今,只要不要过度浸泡PBS(大於十分钟)
我可以一次做12盘都不会有脱落的现象
另外,MDCK虽然是贴附力很强的细胞
但是在没有完全长满的情况下
PBS浸泡或是冲洗细胞都十分容易造成细胞脱落
因此建议还是等细胞完全长满再进行实验会比较妥当
希望我的经验能帮助你罗:)
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.121.106
1F:推 a900535:一次做12盘好厉害...我现在最多也才4盘||| 09/02 12:13
2F:→ a900535:我是用tip把液体吸乾的&助教当时做也都会吸的很乾 09/02 12:13
3F:→ a900535:不过我们都没有一次操作那麽多盘,後来稍微熟练就能比较 09/02 12:14
4F:→ a900535:处理完了~最近在抓能做出漂亮plaque的细胞满度 09/02 12:16
5F:→ a900535:*比较快 细胞满度影响好大,真的很谢谢你的经验分享^^" 09/02 12:17