作者yesdora (话不投机半句多)
看板Biotech
标题[求救] 大鼠肝脏的CPT1-L的western blot
时间Mon Aug 22 19:07:15 2011
大家好
现在我用WB要看大鼠肝脏CPT1-L(Carnitine palmitoyltransferase1)的蛋白质表现
买的是Santa Cruz的CPTI-L (H-95): sc-20669
抗原浓度从未稀释到4倍稀释，抗体浓度从200倍、500倍、1000倍、5000倍、1万倍都看了
但却怎麽都试不出很好的结果 >"<
datasheet上写该蛋白质在肝脏表现是90~94kDa，肌肉组织则是75kDa
但我看的到的结果反而是75左右的地方表现比较强烈。
左边是肝脏未稀释抗体500倍，右边是脂肪组织的对比(75的地方)。
http://ppt.cc/4U2f
肝在100下一点点好像有，但很不清楚，反倒是75的地方比较明显？
这是肝脏抗体5000倍。
http://ppt.cc/_Af1
100下一点好像有一条band？不晓得是不是…
抗原4倍稀释後的更不清楚。
我同个组织看其他蛋白质都没有问题(FAS、ACC、AMPK及其磷酸化蛋白质等，都是4倍稀释)
所以试药应该是没问题才是。
就CPT1-L怎麽试都试不好。
●有可能是抗体本身不好吗？？●
不晓得有没有人可以给我指点一下迷津的，感谢不尽。
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