作者Rarelay ()
看板Biotech
标题Re: [求救] Transfer加0.1%SDS後marker不见了?!!
时间Fri Jul 8 19:28:40 2011
※ 引述《mikis1107 (mikis1107)》之铭言：
: 如题~~
: 因为想要把大分子的转过去
: 所以采用版上跟Abcam建议的方式
: 把methol移除+0.1% SDS进去buffer内
: 但是转了80分钟後发现
: 小分子的marker都不见了@@
: 剩下大分子的marker也变淡很多很多@@
: 请问为什麽会这样??
: 我确定我没有摆反跟电极插错!!XD
: 感谢各位^^
加了 SDS 是为了要增加 protein solubility。
大分子的 protein 在失去 SDS 的时候，溶解度可能会降低，
导致蛋白质无法从 acrylamide gel 中出来。
但是，因为 SDS 会增加 protein solubility，
所以如果你的蛋白质溶解度已经不错了，又加了 SDS，
反而会无法与 membrane 黏附在一起。
另外，一般加 SDS 加到 0.05% 就已经很多了，
可能也要慢慢试最适合你的蛋白质的浓度。
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※ 编辑: Rarelay 来自: 140.112.79.42 (07/08 19:29)