藉这篇文章问一下~ 想请问一下，一般石蜡切片通常不会染免疫萤光染色， 就我所查到的资料是因为石蜡切片本身处理过程会经过福马林处理， 所以会造成抗原变性，因此不适合染免疫萤光染色。 因此免疫萤光染色通常会用冷冻切片。 但我觉得比较疑惑的是，石蜡切片却可以进行其它免疫染色，如IHC，用HRP等。 同样都是免疫染色，为何有这麽大的差别?? 谢谢。 ※ 引述《allisa (小晴)》之铭言： : ※ 引述《ISME0907 (ISME)》之铭言： : : 因为之前不是做切片出身的..有几个问题想请教一下~ : : 这两种切片法的比较 : : 1.应用的广泛性 : : 比如说是不是冷冻切片可以做很多染色实验(immunostain)..但是石蜡切片只可以做 : : HE stain : 冷冻跟石蜡都可以做免疫染色(萤光,DAB呈色) 也都可以做HE stain : 不过像是皮肤还有一些软组织要做HE的话 用石蜡包埋比较能完整看到结构 : : 2.sample的薄度差异 : : 或许说..哪个灵敏度较高? : 石蜡比较好切到很薄(6 um以下都很ok) 不过冷冻要切到6um比较难喔 : : 3.保存性 : : 何者可以保存较久? : 石蜡的蜡块跟白片保存好的话放好几年都没问题 不过冷冻如果切完片了 : 不马上染 有时候很容易tissue会有霜就会有点破碎了 : : 4.操作方便性 : : 何者较快..比较无毒性之类的 : 冷冻比较快 不管是组织脱水包埋 到染色的步骤 冷冻切片都会比较快 : : 印象中好像石蜡切片也可以做抗体抗原的染色实验..但会不会因为实验中加了甲醛 : : 虽然染色前好像会先做一些处理..但是会不会影响染色实验压~..还是大家再做抗体 : : 抗原染色..比较偏好冷冻切片的sample... : 染萤光的会比较偏好用冷冻 其他还好唷 因为石蜡可以放很久 保存比较方便 : 随时要补都还可以再拿片子出来染 : 不过不知道其他人的习惯如何 好像也有人的观念跟你认为的差不多 : : 还有一个问题喔..听说切片後的sample如果再去抽DNA或RNA..它的量都非常少.. : : 我本来以为切片实验的过程中已加入的甲醛..不是已经破坏很多蛋白质了吗? : : 那DNA或RNA的量为何会减少压? : : 请教大家罗~ : 我觉得是因为切完片的sample如果要抽DNA RNA容易lost掉比较多 所以抽到的量才会很少 : 不过这是我的猜测 --

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