作者aggaci (台南工作的基隆人)
看板Biotech
标题Re: [求救] 要怎麽cloning最快
时间Thu Jun 16 22:49:17 2011
※ 引述《spy1015 ()》之铭言：
: 想请问各位，作cloning时拿去定序後
: 发现选出来insert gene有些地方序列有错
: 请问你们会整个再从pcr开始，重新ligation
: 还是把上次ligation剩下的再重新transform呢？
: 我都挑不到全对的序列，已经用pfu dna polymerase了！
你的所有clone都错同一个地方吗
如果这样那是原本template有错
错不同地方还有救
若不想重新PCR
你可以拿几个错不同地方的clone
剪掉他们错的地方再接进对的序列
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单身不代表寂寞，寂寞是走在一个不爱你的人身边的时候。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.121
1F：推 Realthugz:重新做template会不会比较快 06/16 23:09
2F：推 yaliu:我应该会重新PCR~记得用含有校正功能的superTaq或pfu 06/16 23:45
3F：推 FENOR:要用这方法要点运气 06/17 00:14
4F：→ FENOR:也要两者之间刚好有可以切的 06/17 00:14
5F：→ yaprint:会不会是基因本身高度变异的位置? 06/17 00:43