作者ganbaol (Star)
看板Biotech
标题Re: [求救] RT遇到的问题
时间Mon Jun 13 23:52:18 2011
像这种微小的取量
个人会.......用眼睛来判断体积
最小的那种 tip (10ul)
尖端有一小段细细的地方
把那个地方吸满 , 通常是 2ul
吸八分满是 1.5 ul , 吸满四分是 1 ul
取久了你就会知道各个刻度的位子
但是你问我 6.5 在哪我还真不知道 XD
不过真正要很注意的是 sample 加的量
就算取 1ul 要连续取50管
我也会很注意 tip 吸到液体的量有没有准
然後再小心的打进去 mix
当然也一定要看到有打进去 ( 眼见为凭嘛 =口= )
注意不要太大力回抽
至於要知道以上烦杂的取量步骤有没有太大误差
就看 GAPDH 量吧 (如果没有过饱和的话)
※ 引述《starjim (Jim)》之铭言:
: 想请问板上的各位高手
: 因为我在做RT时,Oligo dT 和dNTP会先混在一起(各0.5ul)
: 接着再加1ul到各个sample
: 但现在遇到问题了
: 由於这次sample较多~因此在我各加完1 ul之後
: 发现混合的那管还剩下1ul,各个sample加完那1ul之後体绩是6.5ul
: 因此我把pippet调成6.5ul去吸每个sample
: 发现都刚好~而我也确定我在配olgo dT+dNTP时没有多配
: 那假如这部分有问题的话RT做出来会有什麽样的影响??
: 谢谢~~
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◆ From: 114.42.213.84
1F:推 Realthugz:这基本功要有一定细心度+训练 有时tip变形也马上注意到 06/14 00:02