本来实验室将我们的promoter(-1 ~ -1500 bp) fusion GUS 但转殖後看不到GUS表现 老师和其他老师讨论後 叫我在promoter後接上该gene的first exon 和 first intron再fusion GUS 刚刚在板上爬了一下文 的确有看到first exon上也可能会有调控transcription的region 但这样接的话後面的GUS还会inframe吗??? 我是用pCAMBIA1301将我们的promoter置换掉本来在GUS前的35S promoter 本来promoter後直接是GUS 所以接进去不用管是否inframe 就是从GUS的ATG开始转译出蛋白质 现在加上first exon(有自己的ATG)和intron长度如果不是刚好3的倍数 GUS不就整个出不来了.... 就算是3的倍数 我们也不知道从接的cutting site到GUS的ATG中间又有几个base啊... 如果要用这个方法 是否就要从first exon的ATG开始 到GUS的ATG都要inframe才行??? 而GUS前面多了将近90个胺基酸还能执行原本的功能吗???? 老师是说这些construct应该都是只会认GUS的ATG 不然有些promoter上也有ATG怎麽办 --

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